化妝品防腐效能試驗檢測——ASTM法
2017-01-18 10:35:19
天緯化學(xué)
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ASTM法 這種方法主要應(yīng)用于對經(jīng)防腐和未經(jīng)防腐樣品的比較檢驗。ASTM提供了一系列可使用的微生物。這種方法使用的細(xì)菌保存在營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上，酵母菌和絲狀真菌保存在Mycophil瓊脂培養(yǎng)基上，培養(yǎng)溫度分別為32℃和25℃，菌種每月轉(zhuǎn)接一次。試驗所使用的菌體必須是新鮮的，即細(xì)菌在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基上于37℃培養(yǎng)24h-48h，酵母在25℃下培養(yǎng)48h，絲狀真菌在25℃下培養(yǎng)7天-14天（至產(chǎn)生池子）。這種方法要求在接種細(xì)菌時用無菌接種環(huán)將微生物轉(zhuǎn)移到無菌蒸餾水中，在425nm下控制濃度為1×10的8次方細(xì)菌mll。在接種霉菌時，用接種環(huán)或無菌玻璃棒輕輕接觸霉菌培養(yǎng)物將孢子取出，然后用無菌的不吸水的棉花過濾除去菌絲體，并打散抱子，再用血球計數(shù)器控制孢子在1×10的７次方個ml的水平。ASTM方法取樣時將待測樣品以100g為一份，取3份裝入帶有玻璃珠的容器中。每份樣品加入lm的微生物懸浮液（菌液的最終濃度為1×10的6次方細(xì)菌ml或1×10的8次方酵母ml，混合后的樣品于室溫下保存，在適當(dāng)?shù)臅r間（0，7，14，28天）取一份混合樣與9份Letheeb肉湯混合，采用10倍稀釋溶液，傾注法進(jìn)行菌落計數(shù)，培養(yǎng)時間和溫度同前，最后以第一平板上的菌落數(shù)，得到每克檢驗產(chǎn)品的存活的微生物數(shù)目。有時化妝品會反復(fù)受到暴露或污染。在這種情況下，ASTM方法建議在28天后再進(jìn)行防腐試驗，這種重復(fù)檢驗，可以對消費者使用過程中產(chǎn)品污染的潛在問題作出更好的預(yù)測。例如，它對確定手和身體用清洗液的污染和頻繁使用的睫毛膏的污染都很重要。重復(fù)防腐性檢驗或再培養(yǎng)可以顯示某種特定產(chǎn)品的防腐系統(tǒng)失效前，產(chǎn)品能經(jīng)受住多大的損害。
ASTM要求G-和G+細(xì)菌和酵母菌，在防腐性檢驗后7天內(nèi)至少降低99.9%。本試驗的后期微生物不應(yīng)有什么增長，真菌在28天內(nèi)應(yīng)降低90&，并且試驗期間不應(yīng)該出現(xiàn)增長現(xiàn)象，未經(jīng)防腐的樣品在這兩項指標(biāo)方面都不合格。ASTM是通過在平板上觀察被測菌有無生長的現(xiàn)象，來檢驗培養(yǎng)基對防腐劑的中和效果的。具體做法是：用經(jīng)混合接種的營養(yǎng)肉湯的培養(yǎng)物以10的-1次方、10的-2次方和10的-3次方的菌濃度進(jìn)行平板劃線。這種混合接種物可以是G-、G+及酵母，或是絲狀真菌混合物，在32℃培養(yǎng)18h--24h，或25℃培養(yǎng)72h后無生長的現(xiàn)象就表明沒有對殺菌劑起中和作用。
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